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类风湿关节炎患者 iNKT 细胞频率与 IFN-γ／IL-4的相关性研究
目的：检测类风湿关节炎患者外周血中恒定自然杀伤T细胞（ invariant nature killer T， iNKT）的频率及功能的变化，分析iNKT细胞频率与血清中IFN-γ／IL-4比值的相关性，进一步明确iNKT细胞在类风湿关节炎（ rheumatoid arthritis， RA）发病中的意义。方法收集70例RA患者（并对其中30例患者在缓解期连续跟踪）和40例健康人外周静脉抗凝血并分离单个核细胞（ peripheral blood mononuclear，PBMC），采用流式细胞技术（fluorescence-activated cell sorting，FACS）分析样本中iNKT细胞频率；再对PBMC体外培养，FACS动态检测iNKT细胞增殖频率；MILLIPLEX MAP Human Cytokine／Chemokine kit检测相应血清及PBMC培养上清中IFN-γ／IL-4的水平；RT-PCR检测iNKT细胞中IFN-γmRNA与IL-4 mRNA表达水平。结果与健康对照组相比，RA患者iNKT细胞频率及增殖频率显著降低（P＜0．05），增殖延迟。治疗后缓解期患者iNKT细胞频率及增殖频率有所恢复，与活动期RA患者比较差异有统计学意义（P＜0．05），与健康对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05）；与健康对照组相比，活动期RA患者血清及PBMC培养上清中IFN-γ／IL-4比值升高，差异有统计学意义（ P＜0．05）。缓解期RA患者血清中IFN-γ／IL-4比值下降，与活动期比较差异有统计学意义（ P＜0．05），与健康对照组比较，差异无统计学意义（P＞0．05）；活动期RA患者iNKT细胞中IFN-γmRNA表达升高、IL-4 mRNA表达降低。缓解期RA患者与健康对照组间IFN-γmRNA、IL-4 mRNA表达水平的差异不明显；RA患者外周血中iNKT细胞频率与IFN-γ／IL-4比值呈负相关（ P＜0．05）。结论RA患者存在iNKT细胞频率低下与功能缺陷。 iNKT细胞参与RA发病过程，且与病情活动性密切相关。
关键词： 类风湿关节炎 iNKT细胞频率 IFN-γ/IL-4
