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莫西沙星对脂磷壁酸诱导的人肺泡巨噬细胞凋亡及炎症因子释放的影响
目的 探讨脂磷壁酸(LTA)对人肺泡巨噬细胞(AM)凋亡及炎症因子释放的影响和莫西沙星(MXF)对其反应的抑制作用.方法 收集、提纯及体外培养人AM,LTA刺激4h后,加或不加MXF与其共孵育,于各实验终点用MTT法计算细胞相对活力,光学显微镜观察细胞形态,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR法检测TLR2、IL-1β、IL-8及TNF-α的mRNA水平,ELISA检测IL-8蛋白水平,验证RT-PCR.结果 LTA对AM有细胞毒性,并呈浓度递增关系(P＜0.05),MXF对AM活力无影响(P＞0.05),且可抑制LTA的毒性作用(P＜0.05).LTA促进AM凋亡(P＜0.05),此作用可被MXF抑制(P＜0.05).LTA上调AM中TLR2、IL-1β、IL-8及TNF-α的mRNA表达(P＜0.05),各峰值时间及峰值分别为:12 h(3.56±0.03)、6 h(46.63±7.06)、12 h(28.07±1.24)、3 h(2.34±0.50),上调24 h IL-8蛋白水平,上述效应可被MXF抑制.结论 LTA对人AM有细胞毒性,促进AM凋亡,上调AM中TLR2及炎症因子IL-1β、IL-8及TNF-α的表达,MXF抑制LTA诱导的AM炎症及凋亡,可能在革兰氏阳性菌肺炎中发挥杀菌、抗炎、保护宿主AM免疫活性的作用.
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结核分枝杆菌诱导的人肺泡巨噬细胞对IFN-γ反应性的改变及机制研究
目的:研究结核分枝杆菌诱导的人肺泡巨噬细胞对IFN-γ反应性的改变及其机制.方法:平板计数法评价人肺泡巨噬细胞杀结核菌效应;RT-PCR检测Lc3B rnRNA的表达水平;ELISA测定TNF-α浓度;Griess法测定NO的含量.结果:结核患者肺泡巨噬细胞对IFN-γ的反应性明显降低,在IFN-γ刺激后,其NO、TNF-α和Lc3B的水平均低于健康对照.用结核分枝杆菌分泌的蛋白成分(TB-PPD和ESAT-6)诱导后,人肺泡巨噬细胞对IFN-γ的反应性无明显改变.但用结核分枝杆菌细胞壁上的TLR2和NOD2配体(HKMT和MDP)诱导后,人肺泡巨噬细胞对IFN-γ的反应性降低.结论:结核分枝杆菌可能通过细胞壁上的TLR2和NOD2配体而非分泌的蛋白参与了其诱导的人巨噬细胞对IFN-γ反应性的降低.
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鸟分枝杆菌脂类诱导的人肺泡巨噬细胞抗结核免疫反应性的改变及机制的初步研究
目的：研究鸟分枝杆菌脂类（MALs）对人肺泡巨噬细胞抗结核免疫反应性的影响。方法平板计数法评价MALs对人肺泡巨噬细胞杀结核菌效应的影响；ELISA检测肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）水平；Greisse法检测一氧化氮（NO）水平。结果MALs减弱了人肺泡巨噬细胞对牛结核分枝杆菌（BCG）的杀灭。MALs刺激后，结核分枝杆菌纯蛋白衍生物（PPD）和干扰素γ（IFN‐γ）诱导的人肺泡巨噬细胞TNF‐α和NO的分泌均有所下降。结论 MALs减弱了人肺泡巨噬细胞对结核分枝杆菌的免疫反应性。
