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细胞/分离和提纯文献资料
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不同分离介质对小鼠原代肝星状细胞分离纯化效果的影响
目的 比较不同的分离介质对小鼠原代肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)分离纯化效率的差异.方法 肝门静脉原位灌注,预灌注不含钙镁离子的D-Hanks液及含有Ⅳ型胶原酶的灌注液,取消化后的肝脏,分别采用Ficoll-Paque PLUS、Percoll、Nycodenz作为分层介质,密度梯度离心纯化原代HSCs.显微镜下观察细胞纯度并计算细胞得率.锥虫蓝染色判断细胞活率.激光共聚焦显微镜观察原代HSCs的固有荧光情况.油红O染色观察获得原代HSCs的纯度情况.结果 采用Ficoll-Paque PLUS、Percoll、Nycodenz分离细胞得率分别为(1±0.5)×106,(1±0.5)×105,(0.8±0.5)×106;纯度分别为75％ ～ 85％,91％ ～95％,91％ ～95％；活率均高于90％.结论 用Nycodenz作为分离介质分离肝星状细胞的方案优.
