您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
BCR/AB基因文献资料
-
TEC启动子介导BCR/ABL基因在BaF3细胞中的表达
转P210bcr/abl因小鼠是研究慢性髓系白血病的理想模型,但广泛表达的启动子容易引起转基因小鼠的胚胎致死,所以应用在造血细胞中特异表达的启动子是成功建立转P210bcr/abl基因小鼠模型的关键.本研究探讨TEC启动子介导BCR/ABL基因在BF3细胞中的表达.从小鼠的基因组中克隆TEC启动子的- 364至+22区域,并替换掉IRES2 -eGFP载体的CMVie启动子,同时在该载体的EcorⅠ酶切位点插入7.2 kb的P210bcr/abl基因,再将构建好的载体分别转染BaF3细胞和293细胞,观察eGFP基因与P210bcr/abl基因在2种细胞中的表达情况.结果通过荧光显微镜和流式细胞仪检测发现,eGFP基因在BaF3细胞成功表达,表达率在转染后6、24、72 h分别为7.10％、23.35％和64.61％,而在293细胞中未见eGFP基因表达.RT-PCR在BaF3细胞中扩增出BCR/ABL mRNA中372 bp的片段,而在293细胞中未扩增出任何片段.结论:TEC启动子的-364至+22区域能介导相关基因在造血细胞中高效特异性表达,适合于构建转P210bcr/abl基因小鼠模型.
