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内吗啡肽-1对高糖诱导的人外周血树突状细胞成熟和TLR4表达的影响
目的:探讨内吗啡肽-1(EM-1)对高糖诱导的人外周血来源树突状细胞(PBDC)成熟表型、细胞因子分泌、T细胞增殖和TLR4表达的影响,探讨EM-1对DC免疫功能的调节机制.方法:本研究外周血样品取自18-20岁学生志愿者,将外周血单个核细胞(PBMNC)诱导成未成熟的树突状细胞(imDC).使用高浓度葡萄糖作为刺激因素,EM-1作为干预因素,将实验分为正常葡萄糖(NG)、高糖(HG)、加入EM-1的高葡萄糖(EM)、加入EM-1和纳洛酮的高葡萄糖(Nal)共5组.应用流式细胞术检测PBDC表型变化,ELISA检测PBDC与自体淋巴细胞共培养分泌的细胞因子的变化,CFSE法检测T淋巴细胞的增殖情况,RT-PCR法检测PBDC表面TLR4的表达.结果:与HG组比较,EM组PBDC表面分子CD86、CCR7和CD36表达上调(P＜0.01),而CD83的表达无统计学意义.EM组PB-DC分泌的IL-12,IL-10和PBDCs刺激的T淋巴细胞增殖指数均下降.与EM组比较,Nal组CD86,CCR7,CD36表达降低(P＜0.01),而CD83表达几乎没有变化(P＞0.05).Nal组T淋巴细胞增殖指数极显著升高(P＜0.01).HG组TLR4灰度比值高于NG组,EM组明显低于HG组(P＜0.01).结果表明,高葡萄糖可以促进PBDC TLR4的表达,而EM-1抑制TLR4的表达.结论:EM-1上调高糖诱导的PBDC表面分子CD86,CCR7和CD36的表达,抑制高糖诱导的PBDC成熟.分泌的炎性细胞因子IL-12和IL-10抑制来自PBDC的T淋巴细胞的增殖,而纳洛酮抑制EM-1的作用.EM-1抑制高糖诱导的PBDC表面TLR4的表达.
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甘草酸二铵对百草枯中毒大鼠肺组织TLR -4 mRNA 表达的影响
目的探讨甘草酸二铵（ DG）对百草枯中毒（ PQ）致急性肺损伤（ ALI）大鼠肺Toll样受体4（TLR-4） mRNA、NF-κB mRNA表达及对血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-17（IL-17）浓度的影响。方法将50只SD大鼠采用随机数字表法分为PQ组（n＝20）、DG治疗组（n＝20）和正常对照组（S组，n＝10），PQ组和DG治疗组予百草枯100 mg/kg灌胃1次，DG组于灌胃后立即腹腔注射DG 50 mg/kg（1次/d），S组和PQ组注射等剂量的生理盐水，观察至48 h。取肺组织检测肺湿干质量比（ W/D）；采用RT-PCR法检测肺组织TLR-4 mRNA、NF-κB mRNA的表达情况；ELISA法测定血清IL-6、IL-17浓度。另选择健康SD大鼠50只，分组及各组处置方法同上，观察其7 d内死亡率。结果与S组比较，PQ组W/D、TLR-4 mRNA、NF-κB mRNA表达均明显升高（P＜0．01），血清IL-6、IL-17亦升高（P＜0．01）；DG组干预后，W/D降低， TLR-4 mRNA、NF-kB mRN、AIL-6及IL-17有所降低，与PQ组比较差异有统计学意义（ P＜0.01或P＜0．05）。 PQ组大鼠7 d死亡18只（死亡率90％），DG组死亡8只（死亡率40％），NS组无死亡（死亡率0）。结论甘草酸二铵可抑制PQ致ALI大鼠肺组织TLR-4 mRNA、NF-κB mRNA及血清IL-6、IL-17浓度的过度表达，从而减轻肺损伤程度。
