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人类血小板抗原HPA-15系统PCR-SSP基因分型技术的建立
本研究目的是采用PCR-SSP技术建立人类血小板抗原HPA-15系统的基因分型方法,并应用于血小板供者库的HPA基因定型.采用第11届国际输血协会(ISBT)血小板血清学与基因分型协作组推荐的序列特异性引物,调节引物浓度、Mg2+离子浓度和探索佳PCR扩增条件,建立HPA-15系统基因分型技术.该分型技术的准确性和可靠性,采用第11届ISBT血小板协作组提供的质控样本进行验证,同时采用本研究合成的引物及商品化试剂盒,对50名随机的汉族血小板捐献者进行HPA-15系统基因分型,作为平行对照.应用本研究的方法,对第11届ISBT送检的10份考核样本进行基因分型.结果表明:基因分型结果与ISBT公布的结果完全一致.50名随机的血小板志愿捐献者,经本研究的方法及美国G&T公司的试剂检测,基因分型的结果相符合;观察到的基因频率:HPA-15a和-15b分别为0.5100和0.4900.结论:本研究建立的HPA基因分型技术具有简便、快速、准确的特点,适合于常规HPA基因分型,具有广泛的应用前景.
关键词： 人类血小板抗原 HPA-15系统 序列特异性引物-PCR 基因分型 -
人类血小板抗原-15系统PCR-SBT分型技术的建立
目的 建立人类血小板抗原(HPA)-15系统的分型方法,并应用于血小板供者库的HPA基因定型法采用本研究合成的引物及G & T公司的商品化试剂盒,应用PCR-SBT技术对200名随机的汉族血小板捐献者进行HPA-15系统基因分型,采用第14届ISBT血小板协作组提供的10份质控标本以及德国Inno-train公司提供白质控样品作为平行对照,进行验证.结果 200名汉族血小板志愿捐献者HPA基因频率为HPA-15a0.430,HPA1560.570;基因分型结果与ISBT公布的结果及Inno-train公司提供的质控样品的结果完全一致.结论 所建立6HPA基因PCR-SBT分型技术具有高分辨率、高通量、高精确度、能直接发现新的等位基因等特点,具有广泛的应用前景.
