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登革-2型病毒文献资料
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TaqMan MGB探针实时聚合酶链反应检测白纹伊蚊体内登革病毒
目的初步研究TaqMan MGB探针实时聚合酶链反应(TaqMan MGB Real-time PCR)检测白纹伊蚊登革病毒的敏感性,建立一种敏感、特异、重复性好的登革病毒(Dengue virus,DV)鉴定方法.方法在实验室使雌性白纹伊蚊人工感染Den-2型病毒,设不同的感染蚊虫浓度(只/500μl或只/1 000μl)和不同的分组方法(不加未染毒的蚊虫、分别用未染毒的实验室饲养的雌性白纹伊蚊补加到每份标本10、25、50只/组),利用一步法和二步法TaqMan MGB PCR检测,根据荧光信号判断结果.结果二步法TaqMan MGB PCR可检测到标本中感染蚊虫的低浓度为2只/500μl和3只/1 000μl,一步法TaqMan MGB PCR可检测到标本中感染蚊虫的低浓度为5只/500μl,蚊自身的RNA对登革病毒RNA的检测敏感性并无明显的影响.结论 TaqMan MGB探针检测白纹伊蚊体内的DV敏感度高,特异性好,是白纹伊蚊携带登革病毒指数较理想的监测方法,标本较好的处理方法为500 μl标本处理液研磨20～30只/组,TaqMan MGBReal-time PCR好采用二步法.
关键词： 白纹伊蚊 登革-2型病毒 Taqman MGB探针 实时聚合酶链反应
