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重组Bb(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗文献资料
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猪带绦虫重组Bb(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗的构建及鉴定
目的 构建和鉴定猪带绦虫重组双歧杆菌(Bb)(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗. 方法 用疏水甘氨酸接头连接TSO45W-4B和TSOL18编码基因,通过全基因合成方法合成猪带绦虫TSO45W-4B-TSOL18融合基因.将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1 λT中,构建重组质粒pGEX-TSO45W-4B-TSOL18.电穿孔法将该质粒导入Bb,构建猪带绦虫重组Bb(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗,从具有氨苄青霉素抗性的rBb中抽提质粒进行酶切、PCR和测序鉴定. 结果 全基因合成789 bp的TSO45W-4B-TSOL18融合基因片段.从具有氨苄青霉素抗性的rBb中抽提质粒pGEX-TSO45W-4B-TSOL18,经BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切得到4 944 bp的pGEX-1λT载体片段和789bp的TSO45W-4B-TSOL18融合基因片段,与预期结果相符;以该重组质粒为模板进行PCR扩增得到789 bp的TSO45W-4B-TSOL18融合基因片段,经测序基因片段为789 bp,与预期大小相符. 结论 成功构建了猪带绦虫重组Bb(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗,为该疫苗的表达及免疫原性研究奠定了基础.
