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pSCA1载体文献资料
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结核分枝杆菌Ag85B+Rv3407融合基因自杀性DNA疫苗的构建及鉴定
目的 构建表达结核分枝杆菌生长期抗原Ag85B和休眠期蛋白Rv3407的自杀性DNA疫苗融合基因表达载体,并检测其在BHK-21细胞中的表达. 方法 采用PCR方法从结核分枝杆菌基因组中扩增Ag85B基因和Rv3407蛋白基因,再以二者的混合物为模板扩增Ag85B+Rv3407融合基因,构建真核表达载体pSCA1/Ag85B+ Rv3407,以ELISA法检测其在BHK-21细胞中的瞬时表达. 结果 从结核分枝杆菌基因组中扩增得到Ag85B+Rv3407融合基因,片段大小为1 323 bp,与预期相符.成功构建重组质粒pSCA1/Ag85B+ Rv3407,该重组质粒能在BHK-21细胞中表达目的蛋白(实验组P/N≥2.1). 结论 成功构建结核分枝杆菌自杀性DNA疫苗融合基因表达载体,该重新载体能在真核细胞中表达目的蛋白.
