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应用限制性片段长度多态性分析方法鉴别H1基因型麻疹野病毒感染病例和麻疹疫苗相关病例
目的 在云南省应用H1基因型麻疹野病毒鉴定方法,鉴别H1基因型麻疹野病毒感染病例,应用中国麻疹疫苗株病毒鉴定方法,鉴别接种麻疹疫苗后出现的麻疹样病例是否为麻疹疫苗相关病例.方法 采用逆转录-聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism,RT-PCR-RFLP)方法、序列分析方法鉴别8株麻疹病毒.结果 应用H1基因型麻疹野病毒RT-PCR-RFLP方法对8份标本进行鉴定,其中5份标本RT-PCR产物经 Sal I酶切后,被切成两个片段,分别为408个碱基对(base pair,bp)和159bp,显示5个病例是由H1基因型麻疹野病毒引起的.应用中国麻疹疫苗株病毒RT-PCR-RFLP方法对3份标本进行鉴定,其中1份标本RT-PCR产物经Af1Ⅱ酶切,被切成两个片段,分别为287bp和151bp,显示该病例是由中国麻疹疫苗株病毒引起的.2份标本为非 H1a 基因亚型的麻疹野病毒.结论 应用RT-PCR-RFLP方法对H1基因型麻疹野病毒和麻疹疫苗株病毒的鉴定结果,与麻疹病毒核蛋白(Nucleoprotein,N)基因测序分析的结果一致,可以作为快速鉴别H1基因型麻疹野病毒和麻疹疫苗株病毒的方法.
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宜春市2015年麻疹病毒野病毒感染病例的快速鉴别
目的 引进并运用逆转录多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性分析方法(RT-PCR-RFLP方法)快速鉴别2015年宜春市麻疹野病毒感染病例与疫苗株病毒引起的相关麻疹病例.方法 运用realtime RT-PCR对宜春市400例疑似麻疹病例咽拭子标本进行麻疹病毒核酸检测,引进RT-PCR-RFLP方法对麻疹病毒核酸检测阳性咽拭子标本进行检测是否含有AflⅡ酶切位点(疫苗株病毒有,野病毒没有)鉴别疫苗相关麻疹病例.结果 麻疹病毒核酸检测阳性标本为9例,阳性率为2.25%;9例麻疹病毒核酸检测阳性标本RT-PCR-RFLP方法检测的结果为均未能被AflⅡ酶切开,为麻疹野病毒感染.结论成功引进和建立宜春市麻疹野病毒感染病例与疫苗株病毒引起的相关麻疹病例的RT-PCR-RFLP快速鉴别方法,并鉴别了2015年宜春市9例麻疹病例均由麻疹病毒野病毒感染引起.
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2015年江西省麻疹疫苗株病毒的快速鉴别
目的 运用逆转录多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性分析方法(Reverse Transcription-Polymerase Chain Re-action-Restriction Fragment Length Polymorphism,RT-PCR-RFLP)快速鉴别2015年麻疹疫苗株病毒.方法 用RT-PCR-RFLP方法检测两例疑似疫苗相关麻疹病例咽拭子标本是否含有AflⅡ酶切位点鉴别麻疹疫苗株病毒,同时对标本进行N基因羧基末端450个核苷酸进行序列测定分析,在基因层面进一步证实,以验证RT-PCR-RFLP方法.结果 RT-PCR-RFLP方法鉴定的结果为两例疑似疫苗相关麻疹病例咽拭子标本均能被AflⅡ酶切开,N基因序列测定结果为两例疑似疫苗相关麻疹病例咽拭子标本为麻疹疫苗株病毒A基因型.结论 首次为江西省麻疹疫苗株病毒提供实验室证据.
