首页 > 文献资料
-
一个在小鼠头部特异表达的新基因BSG1 cDNA的克隆及研究
目的克隆小鼠头部发育过程中特异表达的新基因并对新基因可能的功能进行初步分析. 方法采用消减差异筛选的方法筛选小鼠头部特异表达的新基因,并用生物信息学的方法对克隆到的新基因进行序列分析和蛋白结构域的预测.同时,还采用了小鼠胚胎原位杂交、小鼠脑部切片的原位杂交以及鸡胚的原位杂交方法研究BS61基因的表达情况. 结果克隆到1个与小鼠头部发育相关的新基因BSG1(brain specific gene 1),其Gen Bank的登录号为AY210402.该基因包含1个2133bp的完整阅读编码框,编码1个710aa的C2H2型锌指蛋白.它与人的KIAA0441基因在氨基酸水平上有82.8%的同源性.该基因定位在小鼠的第10号染色体上,含7个外显子,6个内含子.BSG1主要在小鼠胚胎、鸡胚的头部表达,并且BSG1在小鼠头部表达的部位局限在海马、齿状回和小脑. 结论 BSG1是1个可能的转录因子,在脑部特异表达.对其研究有助于进一步揭示大脑发育的分子机理.
-
Zn2+对PPR蛋白锌指结构域原核表达的影响
目的 研究Zn2+对PPR蛋白锌指结构域的原核表达、纯化过程的影响,并对Zn2+的作用机制进行了初步探索.方法 采用分子克隆的方法构建PPR蛋白锌指结构域及其突变体的His-SUMO融合蛋白表达质粒,研究Zn2+对其原核表达及Ni-柱亲和纯化过程的影响,并利用快速诱导法对Zn2+的作用机制进行了初步探索.结果培养基中添加1 mmol/L Zn2+可明显提高融合蛋白的稳定性;亲和纯化时在上清中添加10 mmol/L EDTA可明显提高亲和纯化效率;Zn2+作用机制的初探实验表明只有Zn2+可作用于锌指结构位点,并帮助稳定锌指结构域.结论 Zn2+可作用于PPR蛋白的锌指结构位点,并使锌指结构变得稳定;在蛋白原核表达时添加一定浓度的Zn2+可明显提高蛋白稳定性.
