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人乳头瘤病毒16型E6和E7基因及其突变体转化活性的研究
为筛选出可用于研制HPV治疗性疫苗的HPV16型E6和E7基因突变体,故将HPV16型原型株(德国株)E6和E7基因及其各种突变体分别转染Balb/c3T3细胞,观察转染后的细胞在软琼脂培养中的集落形成能力和在裸鼠体内的成瘤能力.结果表明,单独转染和共转染HPV16野生型E6和E7基因的Balb/c3T3细胞系,在软琼脂中呈集落样生长,并在裸鼠体内成瘤;而转染E6基因突变体mE6(50G)、E7基因的两种突变体mE7-1(24G26G)和mE7-3(24G26G67R)以及共转染mE6和mE7-1的Balb/c3T3细胞,在软琼脂培养中极少形成集落,也不能在裸鼠体内成瘤.提示经结构改造后的HPV16 E6和E7基因已失去了对Balb/c3T3细胞的转化活性,而保留了免疫原性,可用于HPV16相关肿瘤治疗性疫苗的构建.
关键词： 人乳头状瘤病毒16型 诱变 恶性转化 Balb/c3T3细胞 -
纳米钴对小鼠胚胎成纤维细胞的毒性
目的 探讨纳米钴对小鼠胚胎成纤维细胞(Balb/c3T3)的毒性作用.方法 将处于对数生长期的Balb/c3T3细胞暴露于分别暴露于30、50、100 nm的0(对照)、1、5、10、50、100 μg/ml纳米钴培养液培养24h.测定细胞活性、培养液上清中LDH的活力及细胞内ROS的含量.结果 与对照组比较,10～100 μg/ml的30 nm纳米钴染毒组和50、100 μg/ml的50、100 nm纳米钴染毒组Balb/3T3细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着纳米钴染毒浓度的升高,不同粒径纳米钴染毒Balb/3T3细胞的存活率均呈下降趋势.与对照组比较,10～100 μg/ml的30、50、100 nm纳米钴染毒组Balb/3T3细胞培养液中的LDH活力及细胞内ROS的含量均较高,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着纳米钴染毒浓度的升高,不同粒径纳米钴染毒Balb/3T3细胞培养液中的LDH活力及细胞内ROS的含量均呈上升趋势.结论 纳米钴对小鼠成纤维细胞的毒性作用与暴露剂量及颗粒直径有关,暴露剂量越大、颗粒直径越小,毒性越大.
关键词： 纳米钴 细胞毒性 Balb/c3T3细胞 -
纳米二氧化钛对小鼠成纤维细胞的毒性作用
目的 探究纳米二氧化钛对小鼠成纤维(Balb/3T3)细胞的毒性作用.方法 将处于对数生长期的Balb/3T3细胞暴露于含终浓度分别为0(对照)、1、10、50、100 μg/ml纳米二氧化钛颗粒(粒径分别为30、50、100 nm)的DMEM完全培养基中培养24 h.采用CCK-8法测定细胞活性,通过测定细胞培养液上清中LDH的活力来检测细胞膜的完整性,并通过测定细胞内ROS含量来探讨细胞毒性的产生机制.结果 与对照组比较,10～100 μg/ml不同粒径的纳米二氧化钛染毒组Balb/c3T3细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着纳米二氧化钛染毒浓度的升高和纳米二氧化钛粒径的下降,Balb/c3T3细胞的存活率呈下降趋势.与对照组比较,10～100 μg/ml不同粒径的纳米二氧化钛染毒组Balb/c3T3细胞培养液上清中LDH的活力和ROS的含量均较高,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着纳米二氧化钛染毒浓度的升高,Balb/c3T3细胞培养液上清中LDH的活力和ROS的含量均呈上升趋势.结论 纳米二氧化钛对小鼠成纤维细胞的毒性作用呈明显的剂量效应和尺寸效应,纳米二氧化钛诱导Balb/c3T3细胞产生大量活性氧(ROS)可能是导致其产生细胞毒性的主要原因.
关键词： 纳米二氧化钛 细胞毒性 Balb/c3T3细胞 -
八氯二丙醚对BALB/c3T3细胞恶性转化的研究
目的检测八氯二丙醚(S2)的细胞恶性转化作用.方法采用传代细胞系BALB/c3T3细胞进行细胞毒性实验确定转化实验的剂量范围,再进行细胞转化实验并对转化细胞进行恶性行为鉴定.结果 S2各剂量组均能诱发该细胞出现典型的细胞转化灶,并呈剂量-反应关系;软琼脂培养证明转化细胞为恶性转化细胞.结论 S2具有致BALB/c3T3细胞恶性转化作用,有必要进行深入研究.
关键词： 八氯二丙醚 Balb/c3T3细胞 细胞恶性转化 -
Balb/c3T3细胞体外转化实验方案的优化
目的:优化Balb/c3T3细胞转化实验.方法:将不同浓度的血清及改良的培养基分别作用于鼠成纤维细胞Balb/c3T3,选择不同的时间点,通过细胞形态学观察和集落实验,对小鼠成纤维细胞Balb/c3T3的致癌效果的分析.结果:改良的操作程序和培养基,培养的细胞-细胞转化时间缩短,表现出更强的集落形成能力,显示出高度的成瘤性.结论:改良的操作程序和培养基的方法可缩短实验周期,节省人、财、物力.
关键词： Balb/c3T3细胞 细胞转化 细胞集落实验 ITES -
Balb/c3T3细胞转化电化学试验方法的研究
目的:利用伏安行为的电化学方法研究Balb/c3T3细胞转化过程中嘌呤核苷酸代谢变化规律,确定细胞转化的电化学检测指标.方法:利用MNNG与TPA诱导Balb/c3T3细胞体外进行转化,同时利用ITEs进一步加速转化效率,在不同时间点对转化的细胞进行细胞形态学观察、软琼脂克隆实验及伏安行为电化学检测,电化学法跟踪BALB/c3T3细胞转化过程中嘌呤含量的变化.结果:实验第10天开始,转化细胞的嘌呤的信号峰值明显高于对照组(DMSO组),细胞内嘌呤含量增多,同时细胞增殖加速.ITEs可缩短转化时间.结论:嘌呤可作为电化学法检测的生物标记物,伏安行为的的电化学法可以快速检测体外细胞发生恶性转化的过程,与传统方法相比,缩短了检测周期,有望成为一种简单、快速、灵敏、低成本的细胞转化检测新手段.
关键词： 细胞电化学 Balb/c3T3细胞 细胞转化
