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地方土猪脑心肌炎病毒的分离、鉴定及全基因组序列分析
脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)是一种自然疫源性人兽共患病病原,但有关地方土猪EMCV的分离、鉴定及全基因组研究等尚未见报道.本研究应用“细胞接种与RT-PCR方法相结合”技术,成功分离到国内首株淮南猪源EMCV,命名为HNXX13株,并对其进行了系统鉴定和全基因组序列测定分析.结果显示,该病毒粒子大小约为24～30nm,呈圆形,不耐酸和热,对胰蛋白酶敏感,对氯仿不敏感,二价阳离子没有保护作用,所感染BHK-21细胞的细胞浆内可见到特异的绿色荧光;基因组全长为7 725bp(GenBank登录号:KF771002),与不同动物源参考毒株的核苷酸同源性为81.0％～99.9％,与国内猪源参考毒株同源性为99.5％以上;基于全基因组序列和ORF的系统发育进化树显示,EMCV可分为G1、G2和G3 3个群,HNXX13株与国内其他参考毒株同属于G1群.研究结果表明,地方土猪可感染EMCV并引起发病,丰富了我国EMCV分子流行病学资料,并提醒在进行地方品种养殖中要充分考虑人兽共患疫病传播的生态学;EMCV存在较大的地域差异,其传播具有一定的区域限制性;EMCV在地方土猪和鼠之间可能存在着交叉感染与传播;EMCV在感染地方土猪时可能会发生个别氨基酸的突变,以适应不同的猪种.
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猪繁殖与呼吸综合征病毒HB-1(sh)/2002株全基因组分子特征分析
猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)可引起妊娠母猪流产,早产,产死胎、弱胎、木乃伊胎及仔猪和肥育猪的呼吸道症状.先于20世纪80年代末期爆发于美国和欧洲一些国家,随后很快传至全世界,给世界养猪业造成了巨大的损失.我国在1995年底爆发该病,之后蔓延到我国很多省份.1996年郭宝清、杨汉春等分别从疑似PRRS的病例中分离出PRRSV[1,2].
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒 全基因组 分子特征分析 -
山羊流产嗜衣原体广东株的鉴定及分子特征分析
目的 确诊疑似羊衣原体感染的病例,分析羊衣原体分子特征.方法 从广东某羊场采集疑似羊流产嗜衣原体病例的子宫内羊水,采用现场病理解剖观察、病料触片吉姆萨染色、显微镜观察、特异性目的基因ompA扩增和序列测定及遗传进化关系分析等方法进行了该病例的确诊及病原分子特征分析.结果 现场解剖发现和羊流产嗜衣原体感染症状极其吻合,吉姆萨染色后显微镜观察可见衣原体特有的特征,自病料中扩增出特异性目的基因片段,表明该病例为山羊感染流产嗜衣原体引起.基因序列遗传进化分析表明该流产嗜衣原体(GenBank登录号KP984478)与2013年公布的中国贵州分离株KF130872遗传关系近(同源性为99.1％),属于同一进化分支,与2002年公布的德国分离株AJ004873遗传关系远(同源性为98.2％).结论 本研究为山羊流产嗜衣原体的新流行病学动态奠定了基础.
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家养野猪脑心肌炎病毒的分离、鉴定及全基因组序列分析
目的：分离家养野猪脑心肌炎病毒（Encephalomyocarditis virus ，EMCV），作全基因组序列测定及与相关物种同源性比较。方法用改进的“细胞接种与RT-PCR方法相结合”技术，成功分离到国内首株家养野猪EMCV JZ1202株，并对其全基因组序列进行测定和分子特征分析。结果分离毒的基因组全长为7735 bp ，与国内外不同动物源EMCV参考毒株的核苷酸同源性为81．2％～99．9％，与国内猪源EMCV分离毒的同源性高达99．4％以上。基于EMCV全基因组、ORF和VP1基因序列绘制的系统发育进化树显示，EMCV可分为 G1、G2和G33个群，JZ1202株与其他国内参考毒株同属于G1群。结论结果证实，家养野猪可感染EMCV并引起发病，提醒作野生动物养殖要考虑EMCV的传播；EMCV存在较大的地域差异，在家养野猪和鼠之间可能存在着交叉感染；EMCV在感染家养野猪时可能发生个别氨基酸突变，以适应不同的猪种。
