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养血活血解毒方及其拆方药物血清对佛波酯诱导的血管内皮细胞ERK/NF-κB通路的影响
目的 探讨养血活血解毒方治疗银屑病的可能作用机制.方法 将养血活血解毒方拆分为养血活血类药物和解毒类药物.80只Wistar大鼠随机分为空白组、全方组、养血活血方组、解毒方组,每组20只.全方组、养血活血方组、解毒方组分别给予相应药物10.18、6.17、4.01g/(kg·d)剂量灌胃,空白组予4 ml的蒸馏水灌胃,连续4天,制备含药血清.人真皮微血管内皮细胞(HDMEC)分为空白组、模型组、全方组、养血活血组、解毒组.除空白组外,其余各组采用佛波酯诱导细胞活化.同时加入相应药物的10％含药血清作用24h.检测各组内皮细胞增殖情况、迁移情况、管腔形成情况,以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)、血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)、细胞外调节蛋白激酶1(ERK1)、细胞外调节蛋白激酶2 (ERK2) mRNA表达,检测VEGF/VEGFR通路及细胞外调节蛋白激酶/核因子κB (ERK/NF-κB)通路蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组细胞增殖,迁移细胞数量,管腔形成数量,VEGF、VEGFR、ERK2 mRNA及VEGF/VEGFR通路、EKR/NF-κB通路相关蛋白表达升高(P＜0.01);与模型组比较,全方组和解毒组细胞增殖,迁移细胞数量,VEGF、VEGFR mRNA表达和p-ERK1、p-EKR2、p-NF-κB p65蛋白表达水平均降低,全方组VEGF、p-VEGFR蛋白表达降低,且全方组细胞增殖、ERK2mRNA表达低于解毒组(P＜0.05或P＜0.01). 结论 养血活血解毒方可通过干预ERK/NF-κB通路,调控促血管新生因子VEGF及其受体的表达,从而对银屑病血管新生的病理环节发挥治疗作用,且全方药效佳,其养血活血组分未对内皮细胞增生环节有影响.
