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补肾化痰复方对多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢内胰岛素信号传导分子的调控
目的 观察补肾化痰复方对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)模型大鼠糖脂代谢及卵巢内胰岛素信号传导分子表达的影响.方法 Wistar雌性大鼠孕16天时分别在颈背部皮下注射丙酸睾丸酮2.5 mg/kg(其子代雌鼠随机分为给药组与模型组,每组10只)或等剂量中性茶油(其子代雌鼠为对照组,10只),每天1次,连续3天.给药组给予补肾化痰复方灌胃,模型组及对照组给予同体积蒸馏水灌胃,每天1次,连续20天.称大鼠体重、卵巢重量,计算脂体比；采用口服葡萄糖耐量试验(OG'IT)测定大鼠0、0.5、1、2h血糖水平；检测血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、空腹血糖及胰岛素水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)；采用Western blot法检测卵巢内胰岛素信号传导分子蛋白激酶B(AKT2)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、葡萄糖转运蛋白4( GLUT4)和细胞外信号调节激酶l(ERKI)的蛋白表达以及AKT2、GSK3β、ERK1磷酸化(P-AKT2、P-GSK3β、P-ERKI)的蛋白表达.结果 与对照组比较,模型组脂体比、OGTT试验0.5、2h血糖水平及HOMAIR均明显升高,HDL-C水平明显降低(P＜0.05).与模型组比较,给药组脂体比、OGTT试验2h血糖水平明显降低,HDL-C水平明显升高(P＜0.05).模型组卵巢组织中AKT2、P-AKT2、GSK3β、P-GSK3β、GLUT4及ERK1的表达明显低于对照组(P＜0.05)；给药组GSK3β、P-GSK3β及GLUT4的表达较模型组明显增高(P＜0.05).结论 PCOS雌鼠存在胰岛素抵抗及糖脂代谢功能异常,并存在卵巢组织信号传导通路的异常.补肾化痰复方能够改善胰岛素抵抗及糖脂代谢功能,可能与胰岛素信号传导分子蛋白表达的调控有关.
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补肾化痰复方对秀丽线虫神经保护的影响
目的 观察补肾化痰复方对秀丽线虫是否具有神经保护作用,进而探讨各组复方神经保护作用可能的机制.方法 实验对象为秀丽线虫,实验分空白对照组、阳性药组和补肾化痰复方组(生慧汤组、地黄丸组).通过CL4176的瘫痪缓解实验进行补肾化痰复方有效药物浓度筛选;由寿命实验、繁殖能力实验对药物延缓衰老作用进行评价,并开展百草枯氧化胁迫实验和活性氧水平检测评估药物抗氧化作用水平,采用实时荧光定量PCR技术检测skn-1 mRNA、hsp-16.2mRNA、hsp60 mRNA表达,探讨该复方可能的作用靶点.结果 补肾化痰复方各组药物能明显缓解Aβ毒性作用,具有神经保护作用,在延长秀丽线虫寿命的同时,还可增强其生殖能力;实时荧光定量PCR结果显示生慧汤组、地黄丸组均能使skn-1 mRNA表达上调(P ＜0.001),且生慧汤组作用更为显著,而对hsp-16.2 mRNA、hsp60 mRNA表达无显著影响.结论 补肾化痰复方生慧汤和六味地黄丸加二陈汤对秀丽线虫能在延缓衰老的同时缓解Aβ毒性,其机制可能与上调抗氧化相关基因skn-1 mRNA表达有关.
