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多重位点特异性PCR文献资料
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多重位点特异性PCR鉴别人参、三七、西洋参掺杂
为建立一种能同时鉴别人参、三七、西洋参及其掺杂品的方法.通过分析人参属ITS,18S和matK序列,寻找特异性SNP位点设计引物,建立多重位点特异性PCR法,并对不同来源的人参、三七、西洋参样品进行扩增,根据特异性条带大小进行鉴别.在退火温度为60℃,循环数为35时,人参、三七和西洋参分别出现约250,500,1000 bp的特异性条带.该方法对于人参、三七、西洋参相互掺杂的混合样品,人参中掺杂三七或西洋参以及三七中掺杂西洋参或人参的检出限均为0.5％,对西洋参中掺杂人参的检出限为0.5％,掺杂三七的检出限为1％.表明建立的多重位点特异性PCR可用于人参、西洋参、三七的掺杂鉴定.
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多重位点特异性PCR鉴别霍山石斛、铁皮石斛与齿瓣石斛药材
为建立同时鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛的多重位点特异性PCR法,解决上述石斛属药材真伪掺杂的难题.通过比对石斛药材ITS及trnL-trnF序列,设计引物,建立多重PCR鉴别法,并对不同来源的霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛样品进行特异性扩增,根据特异性条带大小进行鉴别.结果在退火温度为61℃、循环数为35时,齿瓣石斛、铁皮石斛和霍山石斛分别可扩出584、397和211 bp的特异性条带.本文所建立的方法对齿瓣石斛和霍山石斛的低检测限为1.2 ng,铁皮石斛低于0.24 ng,其对铁皮石斛、齿瓣石斛和霍山石斛的混伪检出限分别为1％、1％和5％.表明多重位点特异性PCR法能特异性鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛.
关键词： 霍山石斛 铁皮石斛 齿瓣石斛 多重位点特异性PCR 掺伪鉴别
