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“短刺法”对兔膝骨关节炎软骨中Ⅱ型胶原及其标记物表达的影响及影像学观察
目的:观察“短刺法”对兔膝骨关节炎(osteoarthritis of the knee,KOA)软骨中Ⅱ型胶原及分子标记物Ⅱ型前胶原羧基端前肽(pro-collagen typeⅡC-terminal propeptide,PⅡCP)、Ⅱ型胶原羧基端端肽(C-telopeptide of typeⅡcollagen,CTX-Ⅱ)表达的影响.方法:40只新西兰兔取10只作为正常组,剩余30只复制KOA模型,X线检测评估造模结果.造模成功的新西兰兔随机分为模型组、短刺组和普通刺法组,每组10只.短刺组和普通刺法组均取“内膝眼”“犊鼻”“阴陵泉”“足三里”“梁丘”穴,短刺组采用贴骨进针,针刺深度以抵骨为准,普通刺法组常规针刺,除“梁丘”外均连接电针仪,每次20 min,每日1次,5次为一疗程,疗程间休息2d,连续治疗4个疗程.正常组与模型组相同固定.治疗结束后采用磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)进行膝关节影像学观察;透射电镜观察膝关节软骨细胞组织结构;HE染色观察膝关节病理学改变;TUNEL法检测膝关节软骨细胞凋亡情况;免疫印迹法(Western-blot)和逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测Ⅱ型胶原蛋白和mRNA表达;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测PⅡCP、CTX-Ⅱ表达.结果:治疗结束后,与模型组相比,短刺组与普通刺法组关节腔积液减少,无软骨下骨水肿;膝关节软骨细胞形态规则,凋亡减少;Ⅱ型胶原蛋白和mRNA表达显著升高(均P＜0.05);PⅡCP水平上升(均P＜0.05),而CTX-Ⅱ水平下降(均P＜0.05).短刺组Ⅱ型胶原蛋白及mRNA表达、PⅡCP、CTX-Ⅱ水平与普通刺法组比较差异均有统计学意义(均P＜0.05);短刺组与正常组比较差异无统计学意义(均P＞0.05).结论:“短刺法”能显著改善膝骨关节炎关节软骨的病理状态,减少软骨细胞凋亡,可能通过调节PⅡCP、CTX-Ⅱ表达来促进Ⅱ型胶原的合成,且效果优于普通针刺.
