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鸡血藤黄酮类有效部位对人肺腺癌A549细胞氧化应激的影响
目的:探讨鸡血藤黄酮类有效部位( SSCE)对人肺腺癌A549细胞的杀伤活性与氧化应激反应的相关性.方法:实验分为SSCE高、中、低剂量组和正常对照组,各组分别加入不同浓度的SSCE(正常组用培养基代替)作用人肺腺癌A549细胞24 h后,采用脂质过氧化物(MDA)、谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测A549细胞MDA,GSH的含量；以2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)为荧光探针,用荧光酶标法和共聚焦荧光显微镜法检测活性氧(ROS)；选择加入SSCE高浓度组同时加入抗氧化剂维生素C(Vit C),维生素E( Vit E),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx),过氧化氢酶(CAT)作用细胞24 h后,采用CCK-8法检测A549细胞增殖情况及荧光酶标仪法检测ROS.结果:加入SSCE后,SSCE各组细胞MDA均含量上升(P＜0.01)、高浓度组GSH含量下降(P＜0.01)；高、中浓度组细胞ROS含量上升(P＜0.01)；共聚焦显示SSCE各组均有绿色荧光,其中高、中浓度组荧光较强；加入抗氧化剂后,各组细胞抑制率均降低(P＜0.05),ROS含量均下降(P＜0.01).结论:SSCE可以改变A549细胞MDA,GSH,ROS水平,其抗肿瘤作用可能是通过诱导肿瘤细胞氧化应激反应而实现的.
关键词： 鸡血藤黄酮类有效部位 活性氧 氧化应激 A549细胞 -
鸡血藤黄酮类有效部位通过CKI途径对人肺腺癌细胞A549细胞周期的影响
目的:从细胞周期蛋白激酶抑制因子(CKI)途径入手探讨鸡血藤黄酮类有效部位(SSCE)对人肺癌A549细胞的周期阻滞作用的分子机制.方法:采用RT-PCR法检测人肺腺癌A549细胞中p21、p27 mRNA表达;应用Western Blotting法测定人肺腺癌A549细胞中p21、p27蛋白表达.结果:160mg/L SSCE作用于人肺腺癌A549细胞24h后,细胞内p21 mRNA表达较对照组增加(P＜0.01);p21蛋白含量较对照组高(P＜0.01),而细胞内p27 mRNA表达及蛋白含量与对照组比较差异无统计学意义;160mg/L SSCE作用人肺腺癌A549细胞48h后,细胞内p21、p27 mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义;细胞内p21、p27蛋白含量与对照组比较差异无统计学意义.结论:SSCE上调p21 mRNA转录水平及蛋白表达量是引起人肺腺癌A549细胞G2/M期细胞周期阻滞的机制之一;p21、p27对SSCE引起的人肺腺癌A549细胞G0/G1期阻滞无直接作用.
