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不同刺灸法对功能性便秘大鼠结肠组织肠神经相关蛋白表达的影响
目的:比较手针、电针和艾灸对功能性便秘大鼠结肠组织肠神经活动相关蛋白降钙素基因相关肽(CGRP)、瞬时感受器电位香草素受体1(TRPV 1)、蛋白酶激活受体-4(PAR-4)表达的影响.方法:60只SD大鼠随机分为空白对照组(8只)、模型组(11只)、西沙必利组(8只)、手针组(11只)、电针组(11只)和艾灸组(11只).以盐酸洛哌丁胺混悬液连续灌胃6d制备功能性便秘模型.西沙必利组和3个刺灸干预组分别于每日灌胃后1h给予相应干预:西沙必利组予西沙必利混悬液3 mg/kg灌胃;其余3组分别采用手针、电针和艾条温和灸的方法对大鼠“天枢”“上巨虚”穴干预15 min,连续6d.计量第6天24 h粪便量,采用炭餐指示剂进行小肠推进率实验,分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot技术检测结肠组织CGRP、TRPV 1、PAR-4 mRNA及其蛋白的表达.结果:与空白对照组比较,模型组24 h粪便量、小肠推进率显著降低(P＜0.01);与模型组比较,西沙必利组、手针组、电针组的粪便量和小肠推进率均升高(P＜0.05,P＜0.01),艾灸组小肠推进率也升高(P＜0.01);与西沙必利组及电针组比较,手针、艾灸两组的小肠推进率均降低(P＜0.01).与空白对照组比较,模型组CGRP、TRPV 1、PAR-4蛋白及mRNA表达水平均升高(P＜0.01);与模型组比较,各治疗组蛋白及mRNA表达水平除艾灸组CGRP外其余均降低(P＜0.05,P＜0.01);与西沙必利组比较,艾灸组3种蛋白表达水平均升高(P＜0.05,P＜0.01),3个刺灸干预组PAR-4 mRNA表达水平均升高(P＜0.01),手针组CGRP mRNA表达水平降低(P＜0.05)、TRPV 1 mRNA表达水平升高(P＜0.05);3个刺灸干预组之间比较,手针、电针两组CGRP、TRPV 1蛋白及CGRP、PAR-4 mRNA表达均低于艾灸组(P＜0.05,P＜0.01),电针组TRPV 1 mRNA表达低于手针组(P＜0.05).结论:3种刺灸方法对功能性便秘大鼠结肠组织CGRP、TRPV 1、PAR-4蛋白及mRNA表达均有不同程度的降低作用.
