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显微捕获联合低体积扩增文献资料
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龙胆紫染色法在显微捕获单细胞分离技术中的应用
目的 建立用于显微捕获单细胞技术的龙胆紫染色法并评价其应用效果.方法 制作20枚口腔拭子脱落细胞悬液,配制0.05g/mL龙胆紫染液.取100μL口腔细胞悬液加入0.15、0.25、0.5、1.0、2.0μL染色液,考察佳染色浓度;分别染色5、10、30、60min,考察佳染色时间;用佳条件染色后抓捕3个细胞,采用联合LV-PCR技术扩增并进行DNA分型检测,进行重复试验20次,并对同一检材未经染色的抓捕细胞进行检测,用于比对STR分型成功率.将龙胆紫染色法用于案例检材的口腔上皮细胞分离检验.结果 100μL细胞悬液加入0.5μL 0.05g/mL龙胆紫染液,染色5min,胞核呈紫红色,与胞浆对比明显;染色时间延长不影响染色效果及细胞分离检验结果.优化后的龙胆紫染色法对低体积扩增无明显抑制(P＞0.05).应用此染色法于案例检材,胞核标识清晰,STR分型结果达同一认定标准.结论 龙胆紫染色法利于细胞核的发现,有助于提高显微捕获单细胞技术的检测效能.
关键词： 法医物证学 龙胆紫染色法 显微捕获联合低体积扩增 口腔上皮细胞
