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纤维蛋白原-凝血酶时间文献资料
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纤维蛋白原-凝血酶时间法用于水蛭质量控制方法的研究
目的:建立一种基于用血液凝固分析仪测定纤维蛋白原-凝血酶时间的水蛭生物活性测定方法(Fibg-TT法),定义效价并建立水蛭标准品.方法:就基源为蚂蟥和日本医蛭的水蛭分别建立了反应体系,水蛭浸提液比空白对照凝固时间延长1s作为1个效价单位(U),定义并测得水蛭标准品效价.将高、中、低浓度的水蛭标准品和供试品的浸提液与0.5％的纤维蛋白原混合,加入凝血酶,用血凝仪测定凝固时间,结果进行对数转换后,用生物检定统计法中的量反应平行线3.3法测定供试品的效价.结果:本实验测得蚂蟥和日本医蛭标准品的效价分别为5650 U·g-1和4130 U·g-1,当两者浸提液的浓度分别在121.5～1130 U·mL-1和17.3 ～66.1 U·mL-1范围内时,对数凝固时间与浓度线性较好(r=0.9985;0.9965),准确度(RSD=4.5％,n=6;RSD=3.6％,n=6)、重复性(RSD =3.8％,n=6;RSD =2.4％,n=6)和中间精密度(RSD=1.7％,n=6;RSD=2.4％,n=6)均良好,该方法测定结果可靠.结论:该方法用延长凝固时间来定义水蛭的效价,并建立水蛭标准品,具有可行性.Fibg-TT法,操作简便,人为因素影响小,客观准确,重复性和中间精密度好,能区分和量化不同批次水蛭的效价,可用于水蛭效价的测定,控制其质量.
