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  • GFR/DDR2嵌和受体的构建和稳定表达的鉴定

    作者:苏金;于江天;王吉村;史曼;朱玲;张健;刘新平;药立波

    目的: 将一在细胞膜表面不表达或低表达的受体胞外区与盘状结构域受体2(DDR2)的胞内区融合,构建一嵌和DDR2受体,避免在活化此受体的同时激活与DDR2有相同配体的受体介导的信号通路,为探索DDR2介导的胞内信号途径奠定基础. 方法: 采用PCR扩增和限制性酶切的方式,将表皮生长因子受体(EGFR)的胞外区与DDR2的跨膜及胞内区进行融合并稳定转染EGFR低表达的293细胞,G418筛选,流式细胞仪检测嵌和受体在膜表面的表达状况. 结果: 成功构建了EGFR/DDR2嵌和表达载体;筛选到稳定表达此嵌和受体的293细胞株. 结论: 融合并稳定表达了EGFR/DDR2嵌和受体.

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