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高温合并化疗对耐药性VX-2细胞多药耐药基因的影响
目的:观察热化疗对多药耐药性VX-2细胞mdr基因的影响. 方法:采用单纯化疗(阿霉素32 μg/mL,1 h),单纯热疗(42.5℃,1 h)及热疗联合化疗(阿霉素32 μg/mL+42.5℃,1 h),分别作用于VX-2及VX-2 mdr1细胞. 观察不同处理组细胞的存活率、mdr1 mRNA及P-gp的表达情况. 结果:热化疗组细胞的存活率明显低于单纯加热组及单纯化疗组,同时热化疗组细胞mdr1 mRNA的表达明显减低或消失,P-gp表达明显减低. 结论: 热化疗可以使多药耐药细胞mdr1 mRNA表达降低或消失,使P-gp表达降低,从而逆转了肿瘤细胞的多药耐药性,提高了化疗的敏感性.
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逆转录病毒转染法建立兔VX-2多药耐药株
目的: 建立VX-2多药耐药(MDR)细胞(VX-2 mdr1). 方法:利用逆转录病毒转染法将带有mdr1 cDNA全序列的逆转录病毒载体pHaMDR1转入到兔VX-2细胞中,MTT法检测细胞在不同化疗药物作用下的存活率;免疫组化检测细胞的P-糖蛋白(P-gp)表达,RT-PCR检测细胞内mdr1 mRNA的表达量. 结果:转基因的细胞对吡柔比星、秋水仙素的耐药性分别提高10和25倍,免疫组化见转基因细胞中P-gp表达增加,RT-PCR示细胞内mdr1 mRNA的表达量增加. 结论:利用逆转录病毒转染法构建了兔VX-2 MDR细胞.