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  • 脂多糖对成牙本质细胞细胞连接影响的体外研究

    作者:李明伟;李鹏;陈博;白玉;程庚;薛云鹏;肖敏;余擎

    目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LP)对成牙本质细胞(odontoblast-lineage cells,OLCs)细胞连接的影响.方法:在细胞培养体系中加入不同浓度LPS(10、100、1 000 ng/mL)作用于OLCs,并以条件培养基(10 ng/mL LPS)中同时加入NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(Pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)和LPS组为对照;分别培养0.5、1、2、6h各时间点采用Western blot观察细胞连接蛋白E-cadherin水平的变化;以实时定量PCR观察细胞连接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1和E-cadherin mRNA水平的改变.结果:经过LPS处理后,ZO-1、occludin、claudin-1和E-cadherin的mRNA表达水平明显降低,且在一定的作用时间范围内呈时间依赖性(P<0.05),但LPS在浓度10~1 000 ng/mL之间作用无明显差异(P>0.05).同时,E-cadherin在蛋白水平随着LPS作用时间的延长其表达水平逐渐降低,而当加入NF-κB抑制剂PDTC时则能抑制这种效应.结论:LPS能够下调成牙本质细胞细胞连接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1、E-cadherin mRNA的表达水平,以及E-cadherin的蛋白表达水平,对NF-κB的抑制能在一定水平上影响上述过程,表明NF-κB参与了LPS对成牙本质细胞连接的破坏.

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