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芦荟提取物对脂多糖诱导的人牙周膜细胞炎性反应的抑制作用
目的:探讨芦荟(AVE)提取物对脂多糖(LPS)诱导人牙周膜细胞(hPDLCs)炎性反应的作用.方法:将hPDLCs分为对照组,模型组(1 μg/ml LPS)和AVE组,浓度为0.05,0.1,0.2 mg/ml的AVE分别处理AVE组的hPDLCs;MTT法测定各组细胞存活率;ELISA法检测细胞上清中IL-6含量;用免疫细胞化学染色检测TLR4的表达情况;免疫荧光染色检测NF-κB-p65的核转情况.结果:各组细胞存活率差异没有显著性,模型组上清液中的IL-6含量显著升高,TLR4表达及NF-κB-p65的核转均明显上调;与模型组相比,芦荟提取物呈剂量依赖性抑制细胞上清液中IL-6的分泌,下调TLR4表达及NF-κB-p65的核转移.结论:芦荟提取物能有效抑制人牙周膜细胞的炎症反应,其机制与TLR4/NF-κB-p65信号通路有关.
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富血小板纤维蛋白提取液对经TNF-α刺激下人牙周膜细胞的影响
目的:检测富血小板纤维蛋白提取液(PRFe)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激下的人牙周膜细胞(hPDLCs)成骨分化能力的影响.方法:组织块法分离培养hPDLCs,免疫组化鉴定其来源;Choukroun法制取PRFe;实验分为空白对照组、TNF-α(10 ng/ml)组、PRFe组和PRFe+ TNF-α(10 ng/ml)组.碱性磷酸酶试剂盒检测ALP活性;茜素红染色观察细胞矿化功能;Western blotting检测Runx2、Osterix蛋白含量.结果:ALP活性检测、茜素红染色和Western blotting结果显示TNF-α组各项指标均低于空白对照组(P＜0.05),PRFe组各项指标均高于空白对照组(P＜0.05),PRFe+ TNF-α组各项指标均高于TNF-α组(P＜0.05),PRFe组各项指标均高于PRFe+ TNF-α组(P＜0.05).结论:PRFe可促进经TNF-α刺激的hPDLCs成骨分化.
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白藜芦醇减轻LPS诱导的牙周膜细胞损伤并抑制TLR4/NF-κB活化
目的:探究白藜芦醇(RES)对脂多糖(LPS)诱导的人牙周膜细胞(hPDLCs)损伤的保护作用.方法:体外培养并鉴定hPDLCs,将培养的hPDLCs随机分为5组:对照组、LPS(10 μg/ml)+RES(0、30、60、90tμmol/L)组,MTT法检测各组细胞增殖能力,ELISA检测各组细胞分泌TNF-α/IL-6水平,PCR和Western blot检测各组细胞TLR4/NF-κB mRNA和蛋白表达.结果:分离培养的hPDLCs抗波丝蛋白表达阳性,抗角蛋白表达阴性.与对照组比,LPS处理后细胞增殖能力明显降低,细胞分泌TNF-α/IL-6水平和TLR4/NF-κB mRNA和蛋白表达明显增加;30～90 μmol/L白藜芦醇预处理后,细胞增殖能力增加(P＜0.05),细胞分泌TNF-α/IL-6水平、TLR4/NF-κB mRNA以及蛋白表达则下调(P＜0.05),均呈现一定的浓度依赖性.结论:白藜芦醇可抑制TLR4/NF-κB活化并减轻LPS诱导的牙周膜细胞损伤.
关键词： 白藜芦醇 LPS 人牙周膜细胞(hPDLCs) TLR4 NF-κB -
乳铁蛋白对人牙周膜细胞增殖迁移分化的影响
目的：观察乳铁蛋白（lactoferrin，LF）对体外培养的人牙周膜细胞（HPDLCs）增殖、迁移和成骨分化的影响。方法：原代培养并鉴定人牙周膜细胞，稳定传代后用 MTT 比色法、Transwell 法及划痕试验检测浓度分别为0、10、20μg／ml 的乳铁蛋白对牙周膜细胞增殖和迁移的影响；矿化条件下，0、10、20μg／ml 的乳铁蛋白作用牙周膜细胞后，茜素红染色法和实时荧光定量 PCR 检测矿化能力及成骨相关基因的表达。结果：10、20μg／ml 乳铁蛋白均能促进 HPDLCs 增殖、迁移（P ＜0．05）。10、20μg／ml 乳铁蛋白组矿化结节数量增多（P ＜0．05），碱性磷酸酶（ALP）、骨钙蛋白（OCN）、骨桥蛋白（OPN）表达量均有升高（P ＜0．05）。结论：乳铁蛋白能够促进人牙周膜细胞增殖、迁移与成骨分化。
关键词： 乳铁蛋白(LF) 人牙周膜细胞(hPDLCs) 成骨分化
