您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
Ⅲα1胶原文献资料
-
针对SP1的圈套寡脱氧核苷酸抑制NIH3T3细胞活力和Ⅲα1胶原基因表达的研究
目的:研究针对转录因子SP1的圈套寡脱氧核苷酸(Decoy-Oligodeoxynucleotide,Decoy-ODN)对小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3)的活力和Ⅲα1胶原基因表达的影响,探讨圈套寡脱氧核苷酸用于病理性瘢痕基因治疗的可能性及机理.方法:设计合成针对SP1的特异性哑铃形Decoy-ODN.用阳离子脂质体转染NIH3T3细胞.分别用流式细胞仪检测ODN转染效率,激光共聚焦显微镜观察ODN在细胞中的分布,电泳迁移率变动分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)验证ODN与SP1的特异性结合.用WST-8检测ODN对细胞活力的影响.用RT-PCR检测ODN对细胞胶原基因表达的抑制作用.结果:分别转染25nM,50nM、100nM、150nm SP1 Decoy-ODN,48h后,细胞活力依次为0.9331士0.0203、0.7479±0.0868、0.577±0.0347、0.4703±0.0147;转染100nM SP1 Decoy-ODN可明显抑制Ⅲα1胶原mRNA的表达(P＜0.01),抑制效果达60%.结论:Decoy-ODN可以通过拮抗核转录因子SP1的活性而抑制NIH3T3细胞的活力和Ⅲα1胶原基因的表达.
