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蛋白转导功能域文献资料
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具有皮肤美容应用潜能的透皮型弹性蛋白样多肽的制备
目的:设计、制备透皮型弹性蛋白样多肽(elastin-like polypeptide,ELP)融合蛋白,探索其作为皮肤美容制剂的潜能.方法:设计具有透皮特性的蛋白转导功能域(protein transduction domain,PTD)和ELP融合蛋白PTD-ELP,联合密码子优化、重叠延伸PCR和定向递归连接等技术构建其原核表达载体.在此基础上将该载体转化至大肠杆菌中,进行异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-Thiogalactoside,IPTG)诱导表达并对目标蛋白的亚细胞定位和可溶性进行分析.结果:成功构建了携带PTD-ELP读码框架的原核表达载体,携带该载体的大肠杆菌在IPTG诱导5h时PTD-ELP融合蛋白的表达量达到峰值,约占菌体总蛋白的23.6%;亚细胞定位分析表明PTD-ELP融合蛋白主要以包涵体形式在胞内表达.结论:成功设计并构建了能够表达PTD-ELP融合蛋白的原核表达载体并在大肠杆菌中实现了其高效表达,为深入探讨PTD介导的ELP透皮给药在逆转皮肤衰老和预防、治疗光老化中的应用奠定了基础.
