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骨髓涂片常规检验的基本实践和体会
目的 根据多年的实践和体会采用全新的概念,对确诊血液病及其疗效、预后和骨髓移植造血功能的恢复判断具有重要意义的骨髓涂片常规检验作了开拓性探索,使该项检验能为临床提供更准确可靠、更直观定量和更新更多的信息.方法 采用理论与实践、经验与体会、具体方法与实验数椐相比较的手段.结果 骨髓液取材部位以髂后上棘为好;骨髓液取材量以真正抽到骨髓液、满足检验的需要为原则,以往规定以0.2 ml左右为佳,而根据作者抽取不同骨髓液量的三组标本统计,抽取0.04～0.20 ml组、0.2～1.00 ml组及1.00～3.00 ml组比较,三组有核细胞定量计数,均值分别为67.6,94.6和119.4,A组与B组,A组与C组均值间差异有显著性意义.所以抽取骨髓液的量以0.5～1.0 ml(0.5 ml左右)为佳;为了涂到数量足够、细胞分布均匀的涂片,提出以EDTA-K2抗凝骨髓液(2～4 mg/ ml);以定量(5 μl)抗凝骨髓液涂成2 cm×3.5 cm能区别头、体、尾的簿片,这样既比较规范又可对巨核细胞进行定量计数,根据38份骨髓液涂片标本实验,采用单位面积法、每张涂片法和定量计数法比较,其变异系数(CV%)分别为65.8,27.6和26.4,显然,定量计数法好;采用批量(每次50～100张)垂直染色可使涂片之间染色结果相对一致,还可避免沉渣附着影响镜下观察;用血细胞计数池直接计数抗凝骨髓液内的有核细胞,高、中、低值标本结果变异系数(CV)分别可达到6.1,6.1和9.6,准确性和重复性十分理想,大大提高了对骨髓增生程度判断的准确性和重复性,而且便于动态观察和回顾性比较;以往采用低倍镜或油镜视野计数成熟红细胞与有核细胞数的比例来判断骨髓增生程度,重复性和准确性差,而且各种型号显微镜的视野面积也有很大的差异. 结论 文中提出了一些全新的观点,例如:骨髓液的抗凝,定量涂片,批量垂直染色,骨髓有核细胞定量计数和巨核细胞定量计数,各型显微镜视野面积不同等,具有很强的实用性和针对性.
