首页 > 文献资料
-
抗α-玉米赤霉醇单克隆抗体的研制及初步应用
目的:制备抗α-玉米赤霉醇(α-ZER)的单克隆抗体(mAb), 建立对动物源性食品中残留α-ZER及其同系物的检测方法.方法:结合O-羧甲基羟胺法和EDC法制备α-ZER-BSA偶联物, 免疫BALB/c小鼠, 采用杂交瘤技术制备mAb.用夹心ELISA测定mAb Ig亚类;按Beatty法计算亲和常数;间接ELISA法测定效价;用直接竞争ELISA检测mAb与α-ZER的同系物、己烯雌酚、 19-去甲睾酮、链霉素及氯霉素等的交叉反应;绘制α-ZER标准品竞争抑制曲线, 检定抗体的灵敏度.用该抗体建立的直接竞争ELISA对37份动物肝组织样品进行检测, 并与HPLC检测结果比较.结果:紫外线扫描证明, α-ZER-BSA偶联成功.实验获得8株可稳定分泌抗α-ZER mAb杂交瘤细胞株, 其中1株(4E5)分泌的mAb效价较高, 为5.142×107, 其Ig亚型为IgG1.该mAb能特异识别α-ZER及其同系物, 而与其它常用兽药无交叉反应.建立了α-ZER直接竞争ELISA, 从HPLC确认为阴性的37份样品中, 筛出8份阳性样品.结论:利用mAb建立的直接竞争ELISA检测方法, 适合动物源性食品中残留α-ZER及其同系物的快速筛选.
-
莱克多巴胺单克隆抗体的制备及竞争性ELISA检测方法的建立
本研究利用偶联的莱克多巴胺(Rac)作为免疫原,筛选出能稳定分泌针对莱克多巴胺的单克隆抗体的细胞株D1289.其分泌的单克隆抗体免疫球蛋白亚类为IgGl.单抗腹水的效价不低于1:1×107,与Rac的类似物克伦特罗不发生交叉反应.在此基础上.利用获得的单抗研究建立Rac的竞争性酶联免疫吸附检测法(cELISA),结果表明:所建立的问接竞争ELISA方法检测校准曲线的线性范围在0.01 ng/mL～10 ng/mL(R2=0.9353).
