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大肠杆菌E.coli文献资料
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重组质粒pUC-CK在大肠杆菌中表达条件的优化
目的:优化含PKCε催化功能域基因的重组质粒pUC-CK在大肠杆菌中表达的佳条件.方法:含重组质粒大肠杆菌培养、表达产物的SDS-PAGE电泳及Western blot检测.结果:PKCε催化功能域在大肠杆菌中表达的佳条件为:含重组质粒大肠杆菌过夜培养时加入0.1%的葡萄糖增加质粒拷贝数;诱导剂(IPTG)的适工作浓度为0.5 mmol/L;诱导适培养温度为30℃;诱导培养时间为2~3 h用于检测,6~24 h用于分离纯化.结论:PKCε催化功能域在大肠杆菌中成功表达,为今后大量表达、纯化该酶蛋白作了前期铺垫.
关键词: PKC 重组蛋白表达 大肠杆菌E.coli