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阳离子脂质体转染文献资料
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人成纤维细胞稳定转染的方法比较
目的 采用3种不同的方法将质粒pEGFP-N1,转染人成纤维细胞,从中寻找佳的稳定转染的方法.方法 分别采用阳离子聚合物转染、阳离子脂质体转染和电转染方法,将能表达G418抗性蛋白和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒pEGFP-N1转染人成纤维细胞.24 h后,荧光显微镜下观察EGFP表达,流式细胞术测定瞬时转染率;通过G418筛选得到稳定转染的细胞.结果 电转染有高的瞬时转染效率(56.8%),稳定转染得到的阳性克隆多,且从细胞筛选到扩增至得到阳性大克隆所用的时间也少(约20 d);用阳离子聚合物瞬时转染率低(1.7%),稳定筛选同样可以得到阳性大克隆,但是数量很少且从细胞筛选到扩增至阳性大克隆所用的时间也多(约30 d);阳离子脂质体转染效果居中,瞬时转染率为39.9%,从细胞筛选到扩增至得到阳性大克隆所用的时间约25 d.结论 用电转染法将质粒pEGFP-N1转染人成纤维细胞是佳的转染方法.
