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  • SH2A 基因对细胞信号转导的影响及其亚细胞定位

    作者:丁茜;赵彦艳;孙志军;于大海

    目的研究Src同源域2(src homology 2, SH2)A基因在细胞信号转导中的作用并进行亚细胞定位.方法通过RT-PCR方法扩增SH2A cDNA编码序列,构建真核重组表达载体pcDNA 3.1-SH2A,利用脂质体转染肝癌Bel7402细胞、COS7细胞,检测蛋白酶C(protein kinase C, PKC)、酪氨酸蛋白激酶(tyrosine protein kinase, TPK)、丝裂原激活蛋白激酶(mitogen activated protein kinase, MAPK)活性的改变;另构建pEGEP-SH2A,转染同前,荧光显微镜观察荧光定位.结果测序结果显示真核重组表达载体pcDNA 3.1-SH2A及pEGFP-SH2A中均含有SH2AcDNA编码序列;肝癌Bel7402细胞、COS7细胞转染pcDNA 3.1-SH2A后,胞浆PKC的活性下降了40%左右,MAPK和TPK活性未见明显改变.荧光显微镜观察发现 SH2 A 基因在细胞质中表达.结论 SH2 A 基因编码蛋白在PKC信号转导通路中起抑制作用; SH2 A基因编码蛋白定位于细胞质.

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