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靶向cyclin D1的脱氧核酶对肿瘤细胞周期的影响
应用RNAdraw和Mfold生物信息学软件进行细胞周期蛋白D1(cyclin D1) mRNA的二级结构预测,设计靶向cyclin D1的10-23型脱氧核酶 (cyclin Dl-DRz),将其转染至肿瘤细胞u251和 HeLa中.逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测发现,cyclin Dl-DRz能明显抑制u251、HeLa细胞中cyclin D1基因的表达,并使细胞周期蛋白E1、细胞周期蛋白A1和细胞周期蛋白B1等表达下降.流式细胞仪技术分析转染前后细胞周期的变化,显示肿瘤细胞阻滞在 G0/Gl期的比例增加.本实验建立了脱氧核酶靶位点的筛选平台,并证实cyclin Dl-DRz能有效干扰肿瘤细胞在细胞周期中的进程.
