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琼脂糖明胶文献资料
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琼脂糖明胶皮下埋植法富集、分离具有自发NETs倾向的小鼠中性粒细胞
目的 建立小鼠中性粒细胞富集、分离的方法,为进一步探讨中性粒细胞及中性粒细胞胞外捕网(NETs)的免疫损伤效应奠定基础.方法 制备2％琼脂糖0.2％明胶块,埋植于健康6～8周龄C57雌性小鼠皮下富集中性粒细胞,96 h后取出明胶块置于PBS中进行游离释放,收集细胞.荧光染色进行细胞形态学观察,采用Gr-1及CD1 1b进行流式细胞分析鉴定.结果 不同表面积的明胶能够分离出106～ 107数量级细胞,具有中性粒细胞典型的分叶核形态学特征,流式细胞分析鉴定为Gr-1+CD11b+的中性粒细胞,纯度可达95.7％,并观察到典型NETs形成,其数量随分离时间的延长而增加.结论 通过皮下埋植琼脂糖明胶成功富集、分离大量高纯度且具有自发NETs倾向小鼠中性粒细胞.
