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钙黄绿素-AM文献资料
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Calcein-AM/PI双染法结合流式细胞术检测γδT细胞毒性的方法
目的 建立和优化钙黄绿素-AM (Calcein-AM)和碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法结合流式细胞术检测γδT细胞细胞毒活性的方法.方法 利用Calcein-AM标记靶细胞,然后与效应细胞共孵育24 h,结束后加入PI,后流式细胞术检测;通过BD公司绝对细胞计数管验证上述流程的稳定性和可靠性.结果 Calcein-AM能在较低浓度(0.1～0.5 μmol/L)下对靶细胞在宽密度范围(0.1～10)×106/ml内进行很好标记,而且24 h内对细胞活率无影响,同时还能与未标记细胞进行很好的区分;整个流程具有很好的稳定性和可靠性.结论 建立并优化了Calcein-AM/PI双染法结合流式细胞术检测γδT细胞细胞毒效应的方法,本方法除操作简单、重复性好、灵敏度高外,还能更好的区分死亡细胞的来源.
