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rhC5a文献资料
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过敏毒素C5a通过Calpain途径致VEC凋亡损伤
目的 探索C5a是否与LPS、毒源性大肠杆菌O157产生的外毒素-V毒素(verotoxin)具有相似的可以导致血管内皮细胞(VEC)凋亡的作用.方法 流式细胞仪榆测细胞凋亡发生率,首先探讨rhC5a刺激的质量浓度,分别为0.2μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL和1.5μg/mL刺激12 h检测VEC凋亡发生率;在rhC5a质量浓度均为1 μg/mL条件下,时间分别为2 h、6 h、12 h、18 h和24 h,检测VEC凋亡发生率.Western blot方法检测凋亡相关蛋白.结果 在rhCSa质量浓度为0.2μg/mL、0.5 μg/mL、1 μmL和1.5μg/mL刺激12 h诱导的凋亡发生率分别为4.58%、7.87%、17.94%和19.03%.在确定rhC5a质量浓度1μg/mL的条件下,VEC发生凋亡呈时间依赖关系,在2 h,6 h、12 h、18 h和24 h的时相,细胞凋亡发生率分别为4.58%、12.78%、18.12%、19.08%和19.96%.rhC5a刺激VEC细胞,calpain-2蛋白表达呈时间依赖性,而calpain-1蛋白的表达为浓度依赖性.结论 C5a可以导致VEC细胞发生凋亡,calpain参与了这类细胞的凋亡进程.
