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吖啶橙-溴化乙锭文献资料
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4种方法检测大气颗粒物PM2.5的细胞毒性
目的 采用多种检测原理和观察终点的细胞毒性试验综合评估提取PM2.5的细胞毒性效应,为深入研究PM2.5生物学效应提供实验依据.方法 用去离子水提取PM2.5,溶于二甲亚砜获得PM2.5悬液.不同浓度PM2.5染毒支气管上皮(HBE)细胞24 h,采用噻唑蓝比色(MTT)、乳酸脱氢酶释放法(LDH法)、台盼蓝拒染法、吖啶橙-溴化乙锭双染法(AO-EB双染法)4种细胞毒性实验评估PM2.5的细胞毒性,并计算半数抑制浓度(IC50).结果 去离子水提取的PM2.5溶于二甲亚砜后呈黑褐色,肉眼可见颗粒成分.不同浓度的PM2.5处理HBE细胞24 h后,台盼蓝拒染法(IC50=815.5μg/mL)、LDH释放法(IC50=827.3 μg/mL)及AO-EB双染法(IC50=887.5 μg/mL)检测结果与空白对照组和溶剂对照组相比,细胞存活率均显著下降(P＜0.05);而MTr法的细胞存活率检测结果显著高于对照组1.5 ～ 4.0倍(P＜0.05),与细胞实际生长状态不符.结论 用去离子水提取PM2.5可减少溶剂带入,能够大程度反映空气污染实际情况;实验采用的4种方法都可检测出水提PM2.5细胞毒性,但由于样品颜色的特殊性,MTT实验不能准确检测本研究中PM2.5的细胞毒性.
