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人白细胞介素-3(hIL-3)文献资料
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银染单链构象多态性技术检测人IL-3基因突变
目的对人白细胞介素-3(hIL-3)基因突变体进行分析和进一步鉴定,建立一种灵敏、快捷的检测基因突变和DNA多态性的方法-即银染单链构象多态性技术(Single strand conformation polymorphism,SSCP).方法将野生型和突变型的人白介素-3(hIL-3)cDNA连接到PUC9和PUC19质粒载体上,转化入大肠杆菌,扩增质粒,用常规方法抽提,酶切,然后将酶切后的DNA片段进行PAGE胶电泳,银染检测野生型和突变型的异同.结果以野生型hIL-3 cDNA作为对照,连接到PUC9和PUC19上的电泳结果均为一致,突变型hIL-3 cDNA的电泳带明显比野生型的电泳带靠后.结论 SSCP方法具有简便,快捷较灵敏的特点,对人白细胞介素-3(hIL-3)基因的点突变得到进一步的鉴定.
