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甲酰基肽受体1对BV-2细胞迁移的影响及机制的体外研究
目的 探讨甲酰基肽受体1(formyl peptide receptor 1,FPR1)对BV-2细胞迁移的影响及潜在机制.方法 免疫荧光染色检测BV-2细胞FPR1的表达,Transwell小室实验分别检测浓度为1、10、50、100、500 nmol/L的FPR1特异性激动剂(formylmethionyl-leucyl-phenylalanine,fMLP)对细胞迁移的影响,划痕实验及Transwell小室实验验证fMLP促进细胞迁移的作用可以被FPR1特异性阻断剂Boc-MLF所抑制.Western blot检测激动剂组、阻断剂组和阻断剂+激动剂组BV-2细胞经干预后其FPR1蛋白和磷酸化细胞外信号调节激酶(phospho-extracellular regulate kinase,p-ERK)蛋白表达量的变化.结果 经免疫荧光染色结果显示,BV-2细胞表达FPR1,主要位于细胞膜表面.随着fMLP浓度的升高,Transwell迁移实验结果显示BV-2细胞的迁移能力明显增加(P＜0.05),呈现出明显的剂量依赖性.100 nmol/L及500 nmol/L激动剂组效果明显,fMLP促进BV-2细胞迁移的适浓度为100 nmol/L.划痕及Transwell小室实验结果显示5μmol/L的Boc-MLF可显著阻断上述现象(P＜0.05).fMLP可以上调BV-2细胞中FPR1的表达(P＜0.05),并且显著活化胞内ERK信号通路,上调p-ERK蛋白的表达水平(P＜0.05),Boc-MLF又可显著抑制上述改变(P＜0.05).结论 BV-2细胞表达FPR1,且FPR1在促进BV-2细胞迁移中具有重要作用.
