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GLP1R基因文献资料
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高分辨率熔解曲线法在GLP1R基因多态性位点rs3765467检测中的应用
目的:建立检测肠促胰岛素样肽-1受体(GLP1R)基因已知突变位点rs3765467(NT_007592.16的第39065819位)的方法,并评价其准确性与实用性.方法:收集我院体检中心2015年10月-2016年2月72例健康体检者的外周静脉血样本,采用柱提法提取其全血DNA,经降落聚合酶链反应扩增后,采用高分辨率熔解曲线(HRM)法对产物进行分析;同时选取其中38例受试样本进行双脱氧链终止法(Sanger测序法)测序验证,比较2种方法的结果.结果:突变扫描结果显示,扩增片段中存在39065817和39065819两个多态性位点.HRM法只检测出了4种基因型[GCG/GCG、GCA/GCG或ACG/GCG、GCA/GCA或ACG/ACG、A(G)CA(G)];而Sanger测序法共检测出6种基因型[GCG/GCG、ACG/GCG、ACG/ACG、A(G)CA(G)、GCA/GCG、GCA/GCA].结论:HRM法可区分GCG/GCG和A(G)CA(G)基因型,但无法区分GCA/GCG与ACG/GCG杂合突变、GCA/GCA与ACG/ACG纯合突变.该方法并不适用于多个邻近位点的单核苷酸多态性检测.在进行单核苷酸突变检测时,应对序列进行综合分析后再选取经济、简便的方法.
