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  • 恙虫病东方体Kato株56kD蛋白基因的克隆与表达

    作者:张雪颖;陈唯军;牛东升;崔红;魏文进;陈梅玲;陈香蕊

    目的表达恙虫病东方体(Orientiatsutsugamushi)56kD保护性抗原蛋白,探索其作为诊断抗原的可能性.方法采用PCR方法,从O.tsutsugamushi Kato株菌种基因组DNA中扩增出56kD基因片段,将该片段克隆于原核表达载体pQE30,构建成重组质粒pQE-56,IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测有无蛋白的表达.结果(1)获得长约1500bp的PCR片段,序列分析结果与已知Kato株56kD基因序列相同;(2)SDS-PAGE检测表达产物,在相对分子量56×104处有表达带;(3)表达后菌体超声破碎后,目的蛋白主要以包涵体形式存在.结论获得了56kD基因片段,并在大肠杆菌中实现了表达.

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