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人Tie2基因文献资料
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Tie 2表达载体的构建及其稳定转染SKOV3细胞系的建立
目的 构建人Tie2基因真核表达载体,并建立稳定过表达Tie2基因的SKOV3细胞系.方法 采用RT-PCR方法从人肝癌细胞BEL-7402细胞系中扩增Tie2基因编码区(cDNA),将产物克隆至pEGFP-N1真核表达载体,构建重组质粒pEGFP-N1-Tie2并测序鉴定.用构建成功的pEGFP-N1-Tie2真核表达载体转染人卵巢癌细胞SKOV3,经G418稳定筛选,分离单克隆,后获得Tie2稳定表达的SKOV3细胞系,并用实时荧光定量PCR、Western Blot方法鉴定构建结果.结果 成功构建pEGFP-N1-Tie2真核表达载体,获得了稳定过表达人Tie2基因的SKOV3细胞株.结论 在SKOV3细胞系中稳定过表达人源Tie2基因,为下一步研究Tie2基因的功能和应用奠定了基础.
