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  • 麦胚凝集素慢病毒载体的构建及其对脂肪干细胞的感染

    作者:王娟;张连国;李宁;雷鸣;马云;彭媛红;卞伟华

    目的:探讨麦胚凝集素(WGA)慢病毒载体的构建与表达的方法,以及WGA在神经系统中跨膜示踪的能力。方法采用基因工程方法,将WGA的基因插入到慢病毒表达载体Plvx-IRES-ZsGreen1中。再采用慢病毒包装,将构建好的质粒和其他3种包装质粒(RPEV、PRRE、VSVG)在293T细胞中进行共转染,获取病毒液后感染人源的脂肪干细胞(hADSCs),将感染后的hADSCs注入小鼠的脑卒中模型,修复神经损伤。结果显微镜下检测到绿色荧光报告蛋白表示感染成功。对感染后的hADSCs进行免疫组化显色,结果显示WGA已经成功的在hADSCs中实现了表达,在MCAO小鼠模型脑损伤处追踪到感染了WGA的hADSCs。结论慢病毒包装WGA蛋白的方法可靠高效,可以作为一种高效的示踪技术广泛应用于各类细胞。

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