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HLCDG1基因转染对肺癌细胞生长的影响
背景与目的: HLCDG1基因是我们实验室近克隆的新基因,它位于 5q33,介于 D5S436~D5S470之间,在肺癌组织中明显表达下调或缺失.本研究旨在观察 HLCDG1基因是否具有抑制肺癌细胞生长的能力.方法:构建 HLCDG1基因的重组质粒 pcDNA3.1(+ )/HLCDG1,通过脂质体转染,将 HLCDG1基因 cDNA导入肺癌细胞系 A549中,经 G418筛选,获得稳定表达的细胞克隆.RT-PCR检测 HLCDG1基因表达,并采用细胞生长抑制实验、软琼脂集落形成实验及裸鼠致瘤性实验,分析 HLCDG1基因转染细胞恶性表型.结果: RT-PCR结果表明转染 HLCDG1 基因的细胞 HLCDG1 mRNA明显表达.转染 HLCDG1基因组、转染空载体组和未转染组, 3组细胞生长倍增时间分别为 70.0 h、 43.3 h和 39.5 h,转染 HLCDG1基因组与两对照组之间的差异有显著性 (P<0.05).计算软琼脂中细胞克隆形成率,结果分别为 8.5%、 29.0%和 35.0%,转染 HLCDG1基因的细胞克隆形成率明显降低.将转染 HLCDG1基因的细胞、转染空载体的细胞和未转染的细胞分别注射入无胸腺的裸鼠体内, 43天后处死动物,剥离出肿瘤组织并称重,各组瘤块平均重量分别为 0.120 g、 0.612 g和 0.924 g,转染 HLCDG1基因的细胞成瘤能力与两对照组细胞比较,差异有显著性 (P<0.05).结论: HLCDG1在肺癌 A549细胞中表达,具有抑制细胞增殖和抑制裸鼠移植瘤形成的作用; HLCDG1可能是一个与肺癌相关的候选抑瘤基因.