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miR-34a对脂肪干细胞移植治疗跟腱炎的影响
目的:探讨微小RNA-34a(miR-34a)的表达对人脂肪干细胞(hADSCs)移植治疗大鼠跟腱炎的影响.方法:CCK-8法检测hADSCs被分别转染miR-34a mimic和miR-34a inhibitor 24 h、48 h、72 h和96 h后的细胞活力情况.注射胶原蛋白酶构建跟腱炎大鼠模型,建模后将大鼠随机分为5组:PBS注射对照组(PBS组)、hADSCs治疗组(hADSCs组)、转染阴性对照(NC)的hADSCs治疗组(hADSCs+NC组)、转染miR-34a mimics的hADSCs治疗组(hADSCs+miR-34a组)和转染anti-sense miR-34a的hADSCs治疗组(hADSCs+anti-miR-34a组).分离跟腱组织,检测跟腱组织的硬度、压力和大负荷拉力等生物力学指标;利用RT-qPCR检测miR-34a及I型胶原蛋白(col-lagen I)、scleraxis(Scx)和生腱蛋白C(tenascin C,TNC)mRNA的表达水平;Western blot测定collagen I、Scx和TNC蛋白表达水平.结果:在体外过表达和敲减miR-34a可分别抑制和促进hADSCs的活力;5组大鼠跟腱组织生物力学测定结果显示,与PBS组相比,hADSCs组大鼠跟腱组织硬度、压力和大负荷拉力显著提高;与hADSCs+NC组相比,hADSCs+miR-34a组和hADSCs+anti-miR-34a组分别显著降低和提高了上述生物力学指标.与PBS组相比,hADSCs组大鼠collagen I、Scx和TNC的mRNA和蛋白表达水平上调;与hADSCs+NC组相比,hADSCs+miR-34a组miR-34a的表达水平升高,collagen I、Scx和TNC的mRNA和蛋白表达水平降低,而hADSCs+anti-miR-34a逆转了上述趋势.结论:miR-34a通过调控脂肪干细胞活力和分化,影响跟腱炎的治疗效果.
