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PGRN基因文献资料
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PGRN基因沉默对人非小细胞肺癌A549细胞增殖及迁移的影响
目的:探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)介导的颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)基因沉默对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其机制.方法:分别用qPCR 和Western blot法检测A549细胞和正常人支气管上皮(HBE)细胞中PGRN的mRNA和蛋白表达水平.采用脂质体转染法将PGRN-siRNA转染A549细胞,采用qPCR和Western blot法验证PGRN表达的变化;应用MTT实验检测细胞活力;活细胞计数法和结晶紫染色实验检测细胞增殖能力;划痕愈合实验和Transwell实验检测细胞迁移能力;并用Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、Bcl-2和Bax的蛋白表达水平以及PGRN下游信号通路中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和蛋白激酶B(Akt)的磷酸化水平.结果:PGRN在A549细胞中的mRNA和蛋白水平均明显高于HBE细胞(P<0.05);转染PGRN-siRNA后A549细胞中PGRN的mRNA和蛋白水平均明显下调,细胞活力、增殖能力以及迁移能力均明显降低(P<0.05).沉默PGRN基因的表达,可下调PCNA、cy-clin D1和Bcl-2的蛋白表达,而上调Bax的蛋白表达,且磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)和磷酸化的Akt(p-Akt)的蛋白水平明显降低(P<0.05).结论:PGRN基因沉默能明显抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖和迁移能力, PI3K/Akt和MAPK/ERK信号通路可能在该过程中发挥重要作用.
