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FCM分析染色体倍数文献资料
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广丰千金薯离体快繁及其气孔观察、染色体倍数FCM分析和DNA变异ISSR检测
目的:对广丰千金薯的离体快繁进行研究,并对其移栽驯化苗和盆栽苗的气孔、染色体倍数和DNA变异进行观察比较、FCM分析和ISSR检测,旨在为广丰千金薯种苗规模化生产提供技术基础.方法:采用植物组织培养的方法,建立和优化广丰千金薯离体快繁技术体系,并用透明胶带粘取法观察和比较移栽驯化苗和盆栽苗的气孔参数,用FCM分析移栽驯化苗和盆栽苗的染色体倍数,用ISSR检测分子标记检测移栽驯化苗和盆栽苗的DNA变异.结果:广丰千金薯离体快繁技术体系为:选取带芽的稍木质化茎段,经70％酒精消毒1 min、无菌水冲洗3次、0.1％氯化汞消毒12 min、无菌水冲洗3次,然后接种到MS+ KT 1 mg/L+ NAA 0.2 mg/L固体培养基上置于温度为(25±2)℃、光照强度为1 500～2 000 Lx、光照时间为14 h/d的条件下培养.待到新芽长至2～3 cm,便将其切下接种于MS+ KT 2 mg/L+ NAA 0.5 mg/L液体培养基中继续置于上述培养条件下培养.培养90d左右便可形成完整植株.移栽时将封口膜打开,依旧置于上述培养条件下培养2～3d,然后取出完整植株洗净培养基后放入盛有浅层MS基本培养液的容器中进行室内移栽驯化,待到新芽从植株上长出,即可取出驯化苗移植于户外盛有沙土(1∶1,40％甲醛消毒)的盆中,每天早晚各浇水1次,成活率达100％.气孔观察、FCM分析和ISSR检测结果显示,移栽驯化苗和盆栽苗的气孔参数和染色体倍数无显著性差异,两者的ISSR扩增谱带也无特异性条带产生.结论:建立和优化了广丰千金薯离体快繁技术体系,再生植株没有发生遗传性变异,可以保证其遗传稳定性.
关键词： 广丰千金薯 离体快繁 气孔观察 FCM分析染色体倍数 ISSR检测DNA变异
