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重组质粒pCMV AIM-1antisense对卵巢癌裸鼠移植瘤的抑瘤效应研究
目的 探讨pCMV AIM-1 antisence重组质粒对卵巢癌裸鼠移植瘤的体内抑瘤效应.方法 (1)人卵巢癌细胞A2780转染pCMV空载体和pCMV AIM-1 antisense重组质粒,G418筛选出抗性克隆,扩增后产生的稳定转染株用于实验;(2)通过RT-PCR、Western blot检测未转染A2780细胞(对照组)、A2780转染pCMV空载体和pCMV AIM-1 antisense重组质粒三组AIM-1 mRNA和蛋白的表达;(3)将稳定转染的pCMV空载体和pCMV AIM-1 antisense重组质粒的A2780细胞注入裸鼠皮下,建立裸鼠移植瘤模型,未转染A2780细胞注入裸鼠皮下作为对照,观察三组裸鼠移植瘤生长情况,计算肿瘤重量和肿瘤体积,并进行统计对比分析;(4) SP免疫组织化学法检测移植瘤组织切片AIM-1的表达.结果 (1) A2780对照组和转染pCMV空载体组AIM-1 mRNA和蛋白表达无明显改变;而A2780转染pCMV AIM-1 antisense重组质粒组细胞AIM-1 mRNA和蛋白表达明显下降;(2) A2780对照组、A2780转染pCMV空载体组和A2780转染pCMV AIM-1 antisense重组质粒组的裸鼠肿瘤重量分别为(1.93±0.21)g、(1.90±0.39)g和(0.77±0.34)g;移植瘤体积分别为(1 011.7±235.6)mm3、(981.2±162.3)mm3和(468.7±119.6)mm3,重组质粒组与空载体组和对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.01);pCMV AIM-1 antisense重组质粒的抑瘤率达53.8％.(3) SP免疫组织化学法检测瘤体组织切片AIM-1的表达情况,见A2780对照组和转染pCMV空载体组AIM-1表达没有明显改变,而A2780转染pCMV AIM-1antisense重组质粒组AIM-1的表达明显减少.重组质粒组AIM-1蛋白表达阳性率和阳性标记指数均明显低于对照组和空载体组(P＜0.01).结论 pCMV AIM-1 antisense重组质粒对A2780移植瘤生长有明显抑制作用.
