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兔骨髓间充质干细胞mHCN4基因修饰后异体心外膜下移植区细胞形态学动态演变
目的 观察兔骨髓间充质干细胞(MSCs)mHCN4基因修饰后异体心外膜下移植区细胞形态学的演变情况,探讨细胞移植治疗缓慢性心律失常的可行性.方法 日本大耳白兔50只随机分为对照组与细胞移植3天、1周、2周、4周组(每组各10只).开胸直视下将0.2 ml含1×106个/毫升转染mHCN4基因的兔MSCs悬液注入兔左室游离壁心外膜下,对照组注入等体积生理盐水.HE染色观察细胞形态、免疫荧光检测EGFP及mHCN4表达.结果 共有46只兔完成实验.对照组表现为轻微炎症反应,动态演变不明显.移植组术后3天时可见大量炎性细胞浸润,移植细胞多为圆形,与周围心室肌界限明显;术后1周时移植细胞数量明显减少,可见部分细胞呈短梭形;术后2周时炎症细胞及移植细胞进一步减少,梭形移植细胞数量增多;术后4周时存活移植细胞形态基本呈长梭形,与周围心室肌界限较模糊.免疫荧光于术后3天时即可检出EGFP和mHCN4阳性表达;术后2周时移植细胞形态已呈典型长梭形,与正常心室肌细胞相邻生长.结论 mHCN4基因修饰的兔MSCs心外膜下移植后存活细胞从圆形逐渐伸展为梭形,可成功表达EGFP和mHCN4通道蛋白,到术后2周时形态已接近于心室肌细胞.