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体外抗AD药物筛选中MTT、Edu和RTCA法的比较研究
目的 比较MTT、Edu和RTCA三种检测细胞增殖方法的重复性、稳定性和灵敏性,探讨使用三种方法进行抗AD药物体外筛选的适应性.方法 采用谷氨酸诱导的PC12细胞损伤模型作为阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease,AD)的体外模型,运用以上3种方法观察补肾益智方提取部位对谷氨酸导致的PC12细胞损伤的增殖变化.结果 MTT法检测药物浓度在100μg/ml时细胞活力和增殖达到47%;Edu法检测药物浓度在25μg/ml时细胞活力和增殖达到36.7%;RTCA法检测药物浓度在25 μg/ml比在100μg/mL和6.25 μg/ml浓度时细胞活力和增殖能力高,且在不同的时间段增殖率有所不同.结论 MTT法简单、快速、经济,结果与细胞中线粒体酶活性有关,间接反映细胞的增殖状态;EdU标记技术灵敏、客观,特异性标记分裂期细胞,直接反映细胞的增殖状态;RTCA法方便、宏观、可信,通过细胞与电极板的相互作用,直观反应细胞的增殖趋势.
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三种化妆品原料细胞毒性检测方法的比较研究
为比较三种细胞毒性检测方法的准确性、稳定性和灵敏性,探讨使用三种方法进行化妆品原料细胞毒性检测的适应性.采用小鼠B16黑色素细胞为受试细胞,比较MTT法、CCK-8法及RTCA法测定不同浓度的α-熊果苷作用于细胞24h、48h及72h后的存活率、IC50值及变异系数的差异.结果表明MTT法价格便宜,操作步骤繁琐,灵敏度低,准确性和稳定性较差;CCK-8法价格较贵,但灵敏度高,结果更准确和稳定;而RTCA法能更直观、准确的反应细胞的生长情况,灵敏度高,准确性和稳定性好.